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27個細胞傳代培養(yǎng)常見問題

1、一般拿到細胞后，應該注意什么?收到細胞先不開蓋,用酒精將整個細胞瓶外壁進行消毒，放在培養(yǎng)箱靜置若干小時后(看細胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議收細胞時的培養(yǎng)基拍一張照片，觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況，顯微鏡下拍細胞100X，200X各兩張)，排除細胞本身污染的情況。2、何時須更換培養(yǎng)基?視細胞生長密度而定，常規(guī)細胞2-3天更換培養(yǎng)基。3、細胞何時進行傳代較好?一般情況下細胞生長至*匯合后就應該傳代，所有細胞生長都有一個要求不宜...

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細胞生長不良常見原因及解決方案

細胞生長不良常見原因及解決方案儲存物解凍后無活細胞或活細胞少原因解決方案儲存培養(yǎng)物質(zhì)量不佳確保正確識別了用于儲存的起始培養(yǎng)物，該培養(yǎng)物是健康的，無微生物污染的，并且處于生長的對數(shù)階段后期（80-90%匯合度）儲存物冷凍不當在液氮中冷凍細胞時2，請確保細胞、培養(yǎng)基和其他實際的濃度以及冷凍方案遵循供應商的建議。通常，應以每分鐘約1至3℃的速度緩慢凍結，以大程度地減少冰晶的形成。為細胞選擇最合適的冷凍保護劑。如果使用甘油，請勿將其儲存在光線下，因為光照會使甘油轉化為具有細胞毒性的烯...

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細胞生長緩慢的原因分析

轉載：細胞生長緩慢的原因分析：一.個別人的培養(yǎng)體系出現(xiàn)問題1.檢查你所培養(yǎng)的細胞是否存在污染。(a)如果培養(yǎng)細胞未添加抗生素(必須添加!),細胞污染則是不可避免的。1)用肉眼和顯微鏡進行檢查2)如果細胞被污染則要棄掉。(b)由于支原體污染不容易覺察到，因此必須定期檢測(c)檢測可能污染的途徑和原因2.檢查你用于培養(yǎng)細胞的培養(yǎng)基和血清(例如:是否批次不同或廠商不同)。如果你常規(guī)使用的是粉劑或10X儲存液，而現(xiàn)在購買的培養(yǎng)基更換為1X液體，而隨后證明問題就出自于此，處理方法請參見...

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培養(yǎng)RAW264.7細胞常見問題及原因分析

在日常培養(yǎng)過程中發(fā)現(xiàn)RAW264.7細胞容易出現(xiàn)的問題主要為以下幾種：1.復蘇不易成功2.細胞形態(tài)變異明顯3.消化困難4.細胞生長緩慢，當你的細胞培養(yǎng)遇到上述瓶頸，不妨試一試以下幾種解決辦法。1、復蘇難以成功原因：RAW264.7對空間十分敏感，復蘇密度太高，細胞增殖太快，加劇細胞營養(yǎng)缺失，加速細胞老化。解決辦法：T75培養(yǎng)瓶復蘇細胞數(shù)量控制在104~1052、細胞變異明顯原因：細胞吞噬抗原過多、培養(yǎng)環(huán)境惡劣都會促使該細胞呈現(xiàn)梭形、長梭形解決辦法：改善細胞培養(yǎng)環(huán)境，例如與細胞...

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對于無外泌體血清你真的了解嗎？

胎牛血清(FBS)是大多數(shù)細胞培養(yǎng)的重要生長支持物，來自天然來源的FBS將包含大量囊泡，例如外泌體。由于FBS的外分泌經(jīng)驗對研究結果有很大干擾，因此外泌體研究中必須使用去除外泌體后的FBS進行細胞培養(yǎng)。無外泌體血清專為外泌體研究而設計；通過過濾無菌收集的健康胎牛血清去除外泌體；胎牛血清中內(nèi)源性外泌體去除率為97%；過濾可有效保護FBS中重要的細胞營養(yǎng)因子；exoFBS和普通FBS在細胞生長速率和形態(tài)上沒有差異。無外泌體血清不含多種由蛋白質(zhì)編碼和調(diào)控的RNA，包括mRNA、mi...

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無外泌體血清|*|春節(jié)不打烊

無外泌體血清|*|春節(jié)不打烊★外泌體簡介外泌體特指直徑在30-100nm的盤狀囊泡，其內(nèi)部包裹了多種蛋白質(zhì)、mRNA、non-codingRNA等分子。外泌體主要來源于細胞內(nèi)多囊泡體，經(jīng)多囊泡體外膜與細胞膜融合后釋放到胞外基質(zhì)中。目前大量文獻報道，幾乎所有類型的細胞都可以產(chǎn)生并釋放外泌體，不同的生物體液(血液、尿液、腦脊液、唾液、乳汁、腹水)中都發(fā)現(xiàn)有大量外泌體存在，外泌體由細胞分泌釋放后，通過個種體液在體內(nèi)傳播，被靶細胞攝入后，釋放內(nèi)部的生物分子，參與細胞間的通訊，調(diào)節(jié)細胞...

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SBI無外泌體血清EXO-FBS-50A-1使用說明

SBI無外泌體血清EXO-FBS-50A-1使用說明產(chǎn)品名稱：無外泌體血清|去除外泌體胎牛血清貨號：EXO-FBS-50A-1規(guī)格：50ml備注：少量現(xiàn)貨，干冰運輸......一、外泌體的基本信息⊙外泌體的大小：外泌體的直徑約40-150nm⊙從研究上來講并不太嚴格區(qū)分外泌體（exosomes）或微泡（microvesicles）⊙外泌體屬于胞外囊泡類，除了外泌體之外細胞還分泌微泡以及其它的膜囊泡⊙外泌體的直接比微泡的要小，后者直徑為100nm-1μm⊙外泌體的數(shù)量：人體中大...

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挑選 ELISA 試劑盒，必須了解的 12 個妙招

挑選ELISA試劑盒，必須了解的12個妙招ELISAKit的誕生，是為了幫助科研工作者省掉繁瑣的實驗過程，提高科研效率。如果選對了試劑盒，用對了實驗技巧，就會讓您的實驗效率事半功倍。市場上各種廠家、品牌，各種種屬、因子，質(zhì)量良莠不齊，如何浪里淘金，選擇既符合研究需求，又品質(zhì)上乘的ELISA試劑盒呢?大師兄教你12招，挑選合適ELISA試劑盒1、查找待測樣本的蛋白濃度可以通過NCBI的文獻，uniprot，pax-dab上給出的蛋白表達量參考值來比較ELISA試劑盒中給出的樣本...

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