產(chǎn)品名稱：人臍靜脈內皮細胞HUVEC（含STR鑒定）   

細胞規(guī)格：1-3×10^6細胞量

庫存狀態(tài)：現(xiàn)貨

培養(yǎng)液：ECM

運輸方式：常溫順豐運輸和干冰順豐運輸

貨 期：復蘇細胞需要1-2周，凍存細胞的需要3-5天（特殊情況會有說明）

質 控：無支原體、無污染、符合標準

研究范圍：僅供科研使用

人臍靜脈內皮細胞HUVEC（含STR鑒定），主營產(chǎn)品是國內傳代細胞和細胞培養(yǎng)相關的生物試劑。GIBCO、HyClone、NTC、SIGMA、 BI 、GEMINI、PAN和SBI無外泌體血清等高品質血清。常規(guī)液體培養(yǎng)基、胰酶、雙抗、無血清凍存液、日本三菱產(chǎn)品、ELISA 試劑盒、Sigma試劑等產(chǎn)品。售后完善，我們以飽滿的熱情歡迎新老客戶選購！

品牌名稱： BI優(yōu)質胎牛血清、ES級別胎牛血清

產(chǎn)品貨號：04-001-1ACS、04-002-1A、04-400-1A

單位規(guī)格： 500ml

血   源： SOUTH AMERICA

溫馨提示：本產(chǎn)品僅限于非臨床科研用途(the product is for Research Use only in non-clinical unit)。

運輸保存及注意點：

1.干冰全程運輸，保證您的使用！

2.-20℃，避光恒溫冰箱，避免反復凍融！

在細胞體外培養(yǎng)的過程中，離開機體保護的細胞是很脆弱的，在陌生的生長環(huán)境下即便是培養(yǎng)條件的輕微改變，也可能對細胞產(chǎn)生無法預估的影響。在原代細胞培養(yǎng)過程中，即使保持培養(yǎng)條件*一致，在傳代過程中，細胞的存活質量也是逐漸下降的。

以人臍靜脈內皮細胞（HUVEC細胞）為例，HUVEC細胞是研究內皮細胞功能的經(jīng)典體外細胞模型。在心血管疾病的研究中，主要用于研究內皮細胞功能改變或損傷后其衍生細胞因子對血壓的影響；在腫瘤研究中，主要用于實體瘤中血管生成的研究。然而，HUVEC在傳代培養(yǎng)過程中，其活力是逐漸衰退的，因此細胞傳代多不超過10代。

傳統(tǒng)的細胞培養(yǎng)主要是通過顯微鏡下形態(tài)學變化以及傳代培養(yǎng)周期的變化預估細胞生長生存狀態(tài)。這種主觀判斷既無法量化，也無法進行統(tǒng)計學分析。因此，目前對細胞存活質量的判斷并沒有準確、客觀的統(tǒng)一標準，并且對體外培養(yǎng)細胞的存活質量控制往往被科研工作者們“忽略”，從而導致實驗結果的不穩(wěn)定。

體外細胞的有效培養(yǎng)新概念——“細胞質控”。通過細胞活力、細胞凋亡、細胞周期、細胞增殖及DNA損傷五方面對細胞生長生存狀態(tài)進行全fang位的監(jiān)控。

在這五個方面中，影響大的便是細胞活力，蘇州千舍生物教你如何判斷細胞活力。在體外細胞培養(yǎng)的過程中，細胞總有一些因各種原因而死亡，總細胞中活細胞所占的百分比，即是我們常說的細胞活力。“細胞質控”中基礎的指標便是細胞活力。常見的流式細胞設備及部分細胞計數(shù)儀器都可以對細胞進行計數(shù)，還可以提供準確、客觀的細胞活力數(shù)據(jù)，為“細胞質控”提供準確、客觀的統(tǒng)計學依據(jù)，細胞活力評估并不困難！

只要滿足以下兩個條件就可以進行細胞活力檢測，正常細胞的細胞膜是完整的。

Propidium iodide（PI碘化丙啶）是一種核酸染料，常用于細胞凋亡(apoptosis)或細胞壞死(necrosis)的檢測和流式細胞儀分析。PI不能通過正常完整的細胞膜，故細胞在處于壞死或晚期凋亡時細胞膜被破壞，這時可為PI著紅色，可以用來分辨壞死細胞/正常細胞。

加入另一種可以透過細胞膜的核酸染料，就可以通過兩種染料將活細胞和死細胞區(qū)分開。

PI經(jīng)常被用來與Calcein-AM或者FDA等熒光探針一起使用，能同時對活細胞和死細胞染色。PI-DNA復合物的激發(fā)和發(fā)射波長分別為535 nm和615 nm。

細胞活力的技術標準界定

應用案例：納米藥物毒性測試

納米藥物的研究是近年來新藥研發(fā)的熱點。納米藥物載體篩選的首要標準是檢測其對細胞的毒性。而在細胞毒性測試中，首先要排除的是基底培養(yǎng)過程中產(chǎn)生的死細胞，即“噪音信號”。在對新型納米藥物載體SEONLA的研究中，Zaloga等人認為只有活細胞比例超過90%方可進行細胞毒性研究，細胞質控的重要性由此可見一斑。

細胞毒性的入門級指標是細胞活力。判斷一種物質（化合物、小分子藥物或蛋白質等）對細胞的毒性首先要觀察的是其是否或誘導細胞死亡，即細胞活力的變化。以維生素C為例，研究發(fā)現(xiàn)，高濃度維生素C對眼癌細胞Y79 Retinoblastoma Cells具有殺傷作用。文章中，作者以眼癌常用化療藥Melphalan作為對照，對經(jīng)過處理的細胞活性進行檢測，發(fā)現(xiàn)，隨著濃度的升高，維生素C對Y79 Retinoblastoma Cells殺傷作用逐漸增強，并且維生素C對眼癌細胞的殺傷作用優(yōu)于Melphalan。這一實驗結果為眼癌更安全、更有效的治療方案的提出提供了理論依據(jù)。

除了細胞毒性研究，細胞質控在病毒感染或者RNA轉染的研究中也是非常重要的。在這一類研究中，轉染/感染試劑或多或少都會對細胞已有一定殺傷作用。因此，在轉染之前，活細胞需要達到一定的比例才可以保證在轉染之后有足夠數(shù)量的細胞進行后續(xù)的研究。而這一比例需要實驗條件摸索才能確定。

怎樣算是消化好了呢？不需要把細胞全部消化成間隔分布很離散的單個圓形才算消化好了，一般你肉眼觀察貼壁細胞層，只要能移動了，多半呈沙壯移動，其實已經(jīng)可以了。

一般能移動了，說明細胞與培養(yǎng)基質材料的附著已經(jīng)消失了，細胞之間的附著也已經(jīng)消失了，細胞已經(jīng)獨立分布了（雖然沒有呈現(xiàn)很廣的離散分布）。這個時候應該停止消化，不要等到看到鏡下所有細胞都分離得非常好，間隙很大，才停止。

細胞就是*成單個細胞懸液，之后在貼壁的過程中仍然會聚集，這個是貼壁培養(yǎng)的細胞，尤其是腫瘤細胞的一個特性，你可以嘗試，準備100%的單個細胞懸液，貼壁后觀察細胞，仍然是幾個幾個細胞聚集在一起。

一些懸浮培養(yǎng)細胞也是如此，容易聚集，不要過幾個小時就拿出來吹打成單細胞懸液。細胞只要能從基質上脫離下來，即使是成片的（比如Calu-3細胞），吹打不超過20次（一般10次即可），成小規(guī)模聚集（10個細胞左右）是正常的，不要再去延長消化時間，等待單細胞懸液出現(xiàn)。

比較難消化的細胞：潤洗方法5min還不能消化，以結腸癌細胞為例，比如HCT15、LS411和KM12細胞，胰酶消化，一般10 cm 培養(yǎng)皿，一次多加入300ul-500ul就足夠了。即使這樣難消化的細胞，一般不超過5min，即可見細胞成片移動，就應該停止消化。一些正常細胞也會有難消化的時候，比如tsDC細胞，用胰酶孵育，3min左右即可看到成片沙狀移動。

常規(guī)的細胞實驗，受消化影響不是很大：如果不用胰酶去孵育而使用潤洗的方法消化的話（難消化細胞例外）。但少數(shù)實驗，比如病毒包裝，對細胞代數(shù)，對細胞狀態(tài)要求*。這個時候，胰酶消化，就是潤洗，都會對細胞包裝病毒的能力有影響，傳代次數(shù)一多，細胞包裝能力就會逐漸下降。這個時候都不用胰酶消化，用一些鹽溶液（不是EDTA液）即可。這些鹽溶液通過影響細胞外基質相關酶的活性，來使得細胞脫離基質附著表面，但不切割任何蛋白。

EDTA的作用：許多人不用胰酶，只用EDTA，或者用胰酶/EDTA聯(lián)合作用。這里要明白，胰酶切割細胞外基質的一些負責粘連和附著的蛋白，而EDTA通過螯合Ca離子，作用于整聯(lián)蛋白的活性，所以EDTA的作用更加溫和。有的人在胰酶里添加一些EDTA，或者對付特別難消化的細胞，添加多一些EDTA，就是這個道理。一般不要試圖延長消化時間（如果10min還消化不*的話），而應該想其它辦法。

PBS洗滌：消化之前用PBS洗滌，是常見的操作，因為血清中含有抑制胰酶的蛋白。對于一些難消化細胞，可以配制不含Ca，Mg離子的PBS，因為這些離子也會抑制胰酶的活性。但對于絕大部分細胞用胰酶或者EDTA溶液潤洗即可消化，不需要配制不含Ca，Mg離子的溶液。

每段時間定期對細胞房、培養(yǎng)箱&水盤、水浴鍋、廢液桶等容易染菌的個角落細菌、真菌等微生物的清除，每次操作完都整理好細胞房，帶好手套、口罩、鞋套，防止人為因素污染。

MCF7/Taxol人乳腺癌紫杉醇耐藥株

HCT8/5-fu 人回腸直腸腺癌細胞五氟尿嘧啶耐藥株

LOVO/5-FU 人結腸癌細胞五氟尿嘧啶耐藥株

HCT116/L人結腸癌奧沙利鉑耐藥細胞

HL60/ADR人早幼粒急性白血病細胞耐阿霉素株

PC9GR(PC9R)人肺癌細胞耐吉非替尼

LOVO/ADR人結腸癌細胞阿霉素耐藥株

HNE1/DDP人鼻咽癌細胞順鉑耐藥株

SGC7901/5-fu人胃癌細胞五氟尿嘧啶耐藥株

A549/DDP人肺癌細胞順鉑耐藥株

MCF-7/DDP人乳腺癌細胞順鉑耐藥株

A549/ADR人肺癌細胞阿霉素耐藥株

SGC7901/DDP人胃癌細胞順鉑耐藥株

SKOV3/DDP人卵巢癌細胞順鉑耐藥株

HELA/DDP人宮頸癌耐順鉑細胞株

3T3-L1 小鼠胚胎成纖維細胞

NIH/3T3小鼠胚胎細胞

Raw264.7小鼠單核巨噬白血病細胞

B16-F10小鼠黑色素瘤高轉細胞

B16 小鼠黑色素瘤細胞

CT26.WT小鼠結腸癌細胞

SV40 MES 13小鼠腎小球系膜細胞

F9 小鼠畸胎瘤細胞

MLE-12 小鼠肺泡上皮細胞

Sp2/0-Ag14 小鼠骨髓瘤細胞

BV2 小鼠小膠質細胞  

DC2.4小鼠樹突狀細胞

U14 小鼠子宮頸癌細胞

M-NFS-60小鼠骨髓性白血病細胞

mMSC小鼠骨髓間充質干細胞

HL-1小鼠心肌細胞

TM3 小鼠睪丸間質細胞

k7m2.wt小鼠骨肉瘤成骨細胞

mc3t3 e1小鼠胚胎成骨細胞前體細胞

hepa1-6 小鼠肝癌細胞

SP2/0小鼠骨髓瘤細胞

HT22小鼠海馬神經(jīng)元細胞系

MC38小鼠結腸癌細胞

mpc5小鼠足細胞

4T1 小鼠乳腺癌細胞

ANA-1小鼠巨噬細胞

TM4 小鼠睪丸支持細胞

STO 小鼠胚胎成纖維細胞

bend.3 小鼠腦微血管內皮細胞

J774A.1小鼠單核巨噬細胞

H9C2 大鼠心肌細胞

PC-12(低分化) 大鼠腎上腺嗜鉻細胞瘤細胞(低分化)

PC-12(高分化) 大鼠腎上腺嗜鉻細胞瘤細胞(高分化)

AR42J 大鼠胰腺外分泌細胞

IEC-6 大鼠小腸引窩上皮細胞

RT4-D6P2T 大鼠神經(jīng)鞘瘤細胞

INS-1 大鼠胰島細胞瘤細胞

NRK-52E 大鼠腎小管導管上皮細胞

BHK-21 倉鼠腎成纖維細胞

PK-15 豬腎細胞

Duckembyro 鴨胚胎成纖維細胞

vero 綠猴腎細胞

Hep3B人肝癌細胞

HPAC人胰腺癌細胞

HT-1376 人膀胱癌細胞

JAR 人胎盤絨毛癌細胞

KNS-89 人腦膠質細胞瘤細胞

雙抗 15140-122、SV30010

胰酶 25200-056、SH30042.01

GIBCO 胰酶 25200-072

DMEM高糖培養(yǎng)基 C11995500BT

DMEM低糖培養(yǎng)基 C11885500BT

PBS C10010500BT

1640培養(yǎng)基 C11875500BT

DMEM/F12 C11330500BT

MEM培養(yǎng)基 C11095500BT

α-MEM C12571500BT

DMEM低糖 SH30021.01

DMEM高糖 SH30022.01、SH30243.01

DMEM/F-12 1:1 SH30023.01

MEM/EBSS SH30024.01

PBS緩沖液 SH30256.01

α-MEM SH30265.01

RPMI-1640 SH30809.01

DPBS SH30028.02

185310-5G I4381 467871-250G

C4642-25G G4410 SML0223-10MG

229520-10G C6780 V900471-25G

482315-1G C8356 V900922-100G

429732-1G V1255 L9283-10MG

236489-100G 335681 524980-1L

F2877-500G A9251 F8263-500g

F2877-100G D9515 79255-100MG

31232-250G C1184 76524-100MG

334065-50G R2625 650471-1L‍

203521-100G 75688 V900830-5G

262072-25G T7505 V900852-25G

379816-1G 193992 43820-10G

C4151-5G T1503 D0550-100G

71643-250G B8026 52976-1MG-F

30435-500G C3389 P3803-100ml

I1406-250MG C3667 A7906

R3875-10MG B5887 82524-1KG‍

398853-5G C8356 T46108-100G

61197-250G H4272 P1609000

M7634-100G D8418 158534-10G

V900271-500G D2629 383112-100G

63138-250G S5631 T2036-100MG

M1880-500G C7698 14400-100MG

223506-25G A2058 A7085-100G

223506-500G P3932 K1512-500G

C7902-500G 219703 15972-5ML-F

C5080-500G R7632 72609-100MG

21097-250G 12072 S3132-100MG

12022-1KG G3632 C2932-5MG

C3306-100G 246171 L2378-10MG

71649-500G G8270 I3377-5G

71650-1KG C6762 C7397-1G

B6768-500G *09713 471283-100ML

V900267-500G 15222 R0395-1MG

B7901-1KG A7030 706329-1G

C1016-500G L2630 74738-5ML

C4901-500G D9515 471933-5g

V900266-500G D2650 R8781-200UL

C5670-500G D2650 S7276-25G

C5670-100G D2650 N9125-10G

C1016-100G D2650 483028-10G

S9638-25G D2650 412805-100ML

S9638-500G H26456 E14578-100G

71507-250G D4540 V900415-25G

S9638-250G 71720 C0400-25MG

B1334-100G 208825 85450c

P6526-100G 134996 1430101

449830-5G A6380 T8656-50G

298182-10G C5138 77160-25G

900168-5G F9037 G4382-250mg

554359-5G K4894 52517-10ml

203602-50G D5758 14265-2ML

211168-50G I2393 72954-1ML-F

467901-50G A5503 S5506-250G

76070-5G D9542 A3381-25G

M1003-100G 156124 33742-100G

M1651-100G 50531 206075-1G

331058-100G A6419 205796-2G

202908-10G E7023 E9508-100ML

439800-5G G4507 21479-1ML

105937-5G S4641 R0901-100ML

459097-5G G9268 119660-25G

A6014-10G C9752 209465-25G

293733-5G 265357 F3510-100G

B4554-25G T0303 R8004-5MG

258024-5G M4125 32417-500MG

T3251-25G S5390 S8875-500G

A2056-1MG 81242 B4501-100MG

B6149-25MG T2885 04269-1KG

11569-25MG C7902 206075-1G

71162-25G 230251 205796-2G

N1376-25G A9434 E9508-100ML

G0639-5G-9 P1379 21479-1ML

381071-25G S5761 G25150-50G

B0750-500G M3516 17843-250G

73677-250MG S7795 A4106-25G

L2884-10MG C6905 65969-10MG

L2884-5MG C6288 T9250-5G

C2885-25G C0406 S9251-100g

L8533-250MG S5761 P9380-5G

62613-250G P9155 13180-100ML

518018-10G L2880 A88182-100G

E6511-100G I5500 A41801-100G

P7629-10G I6634 65760-250ML

A7302-250G 255327 86578-250ML

A7085-100G S0130 V900486-250G

T5648-1G P8169 63689-100ML-F

T5648-5G 269913 G5422-100G

85256-50MG PVP40 P2126-100G

C2204-250G 77627 78830-1G‍

77403-100MG L1012 P9762-25G

163333-25G D4551 131164—25g

56485-1G P1860 C4582-10MG

56485-250MG D2926 PHR1396-1g

A6141-500G T7875 03128-5ML-F

09830-500G A2427 21719-5ML-F

324817-250MG D5879 202185-25G

Hyclone胎牛血清SH30084.03  、Hyclone胎牛血清SH30406.02  、Hyclone胎牛血清SH30406.05 、Hyclone胎牛血清SH30396.03  、Hyclone胎牛血清SH30070.03

特級胎牛血清 SH30070.03E 、Hyclone胎牛血清 SH30370.03  、活性炭/葡聚糖胎牛血清 SH30068.03  、活性炭/葡聚糖處理胎牛血清，熱滅活 SH30068.03HI 、馬血清SH30074.03  、烏拉圭胎牛血清 SV30087. 03 、Hyclone胎牛血清SH30071.03 、Hyclone胎牛血清SV30160.03。

BOVOGEN胎牛血清 SFBS 、BOVOGEN新生牛血清 SNCS。

PAA 普通胎牛血清FBS A15-101 、PAA 優(yōu)等胎牛血清FBS A15-151。

BI優(yōu)等胎牛血清 04-001-1ACS 、BI ES級別胎牛血清 04-002-1A 、

BI 間充質胎牛血清 04-400-1A 。

Corning胎牛血清 35-076-CV。

PAN胎牛血清FBS P30-3302  、PAN胎牛血清FBS ST30-3302 、PAN ES級別胎牛血清 ST30-2602 、PAN胎牛血清Plus ST30-3302P 。

NTC優(yōu)等胎牛血清 SFBE。

Gemini優(yōu)等胎牛血清 900-108 、Gemini特級胎牛血清 100-500  、Gemini科研用人AB血清100-512 。

TCB胎牛血清 101ZC。

Sigma 特級胎牛血清F2442 、Sigma正常人AB血清 H4522 。

SBI 無外泌體血清 EXO-FBS-50A-1

GIBCO胎牛血清盒裝A31608-02、GIBCO馬血清16050-122、GIBCO 胎牛血清10270-106

雙抗15140-122、SV30010  、胰酶 25200-056、SH30042.01 、GIBCO 胰酶 25200-072。