何為細胞老化？

1882年，德國生物學家Weismann曾大膽預測“在細胞水平存在老化現象"。他推測：機體的壽命限制受控于體細胞的分裂能力；在遺傳進化中，不同物種的體細胞獲得了不同分裂的潛能，從而決定了不同物種的壽命長短。

20世紀50年代，Swin和他的同事利用原代細胞體外培養試驗證明了來源于不同物種的纖維細胞均不具備無限分裂的潛能。取得突破性進展的還是Hayflflick和Moorhead，他們做了更系統更細致的觀察和描述，他們對25株人成纖維細胞進行原代培養，在這個過程中發現，經過約50次傳代之后，所有細胞出現功能退化，并且喪失分裂能力的現象。此后人們將這一現象稱之為“Hayflflick極限"或者自發性老化。之后也有事實證明，細胞老化并不是體外培養所導致，細胞在體內也會隨著年齡的增長，逐步走向老化。

※細胞老化最開始的現象通常為細胞內部會出現空泡（可能是凋亡小體），也可能會出現黑點，大多沿細胞周邊排布，內部中間也可能會顯現一些，但相對周邊較少；

※老化的細胞會出現細胞體積縮小，胞質濃縮，胞膜起泡，皺縮等現象；

※老化以后的細胞會出現立體感慢慢消失，開始成扁平狀，細胞與細胞之間的間隔減小或混在一起，細胞不再是梭形，而會成為各種不規則形狀；

※細胞折光性變差，鏡下可見細胞“變薄"，做轉染實驗時，細胞死亡率會較高，但培養液不會發生迅速變黃的現象，仍清亮。（如果是細菌污染的話，一般會出現培養液的迅速變黃，混濁，鏡下可見大量繁殖的細菌；若是支原體污染的話，細胞也會失去正常形態，會有細胞的死亡）；

※細胞的貼壁性減弱，開始有細胞漂浮在培養液中；

※老化的細胞表面分泌物會增多，細胞表面的純凈度越來越低；

※分裂的細胞數量明顯的減少，同時細胞的增殖速度也會大大下降；

細胞開始長角分化。

細胞培養中如何預防老化？

防止細胞老化最主要還是要做到勤觀察、勤換液、勤傳代、勤保種，特別是傳代，不能等細胞太密了之后傳，一般細胞建議長到70％融合度傳代最好；

換培養液應該根據自己細胞消耗培養基的情況來確定是否該換。如果感覺時間不好把握的話就多培養幾瓶細胞，在不同的時間換液，最后再來比較下，看什么時候換液好，得出自己的結論；

選擇正確的血清與培養基：細胞對血清特別敏感，直接影響細胞的生長。一定要選擇適合的血清不然就會因營養物質不協調而導致細胞老化；

在間充質干細胞培養時必然要進行消化，但是消化對細胞的表面蛋白質有很強的破壞作用，因此不能長時間進行消化并且在選擇消化酶時也要選擇較為合適的pH和濃度，不然就會使細胞老化或者分化；

在開始養細胞并傳代時，也要特別注意凍存細胞，以保持細胞有種子庫存在，可以有效避免細胞損傷。

雖然，老化細胞不會立即死亡，但其基因表達會發生變化，如果細胞老化現象嚴重，建議從種子庫或工作庫重新復蘇細胞。