關于WinSera血清熱滅活問題

更新時間：2022-08-18

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關于WinSera血清熱滅活問題

1. 為何會有熱滅活血清呢？

加熱可以滅活補體系統。啟動的補體系統參與溶解細胞事件，刺激平滑肌收縮，細胞和血小板釋放組胺，啟動淋巴細胞和巨噬細胞活化。在免疫學研究中，培養ES細胞、昆蟲細胞和平滑肌細胞時，推薦使用熱滅活血清。

2. 血清熱滅活是否必要？

血清熱滅活的步驟在1970年代就已建立，至今成為很多實驗室的常規血清前處理步驟；但許多先前認為必須熱滅活的原因，卻早已經不再成立：

去除支原體污染?
早期血清加工使用的450nm濾膜，早已被100nm濾膜取代；且隨著加工技術的創新及嚴格的監控，血清產品早已沒有支原體污染的疑慮。
去除補體等對熱敏感的物質?
胎牛血清中含有的補體僅為成年牛血清5-50％，而C3（補體中引起免疫反應的主成分）在胎牛血清中則幾乎不能檢出，直接使用血清對大多數的細胞株沒有負面影響。

實驗顯示，大多數的細胞不需要熱滅活血清，對于非必須的細胞來說血清滅活對于細胞生長只有微小甚至無任何作用，還可能造成生長速率降低，沉淀物還會顯著增多，不利于細胞觀察。因此，若非必須，不需要對血清進行滅活處理。

3. 血清熱滅活對細胞生長有幫助嗎？

細胞生物學家比較了正常熱滅活胎牛血清對各種細胞株的生長能力影響，發現11株細胞中，熱滅活對6 株細胞有負面影響（紅）、3株無影響（綠）、2株有微弱正面改善（黃）。

▲ 使用未滅活或滅活血清的細胞生長狀況

所以，在正常操作下，熱滅活通常對“細胞生長"沒有明顯的促進作用，反而會破壞血清內生長因子，維生素，氨基酸等珍貴物質，降低細胞增殖速度。

4. 血清熱滅活的缺點？

若實驗員設錯水浴溫度或忘記按計時器，都會導致過高的加熱溫度（下圖）或過長的加熱時間（下圖），進而大大降低血清的功能，影響細胞生長的表現。

缺點1：

▲ 過高的加熱溫度降低大多細胞株生長速度（僅一株未受明顯影響）

缺點2：

▲ 過長的加熱時間降低大多細胞株生長速度

（僅一株未受明顯影響）

滅活加熱過程會增加血清的沉淀狀況，而沉淀又常常被認為是微生物的污染，進而耗費大量時間及精力驗證是否污染，導致實驗一再拖延。

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